Тест-система для индикации и дифференциации M.bovis и M.tuberculosis методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени

Описание

Тест-система предназначена для обнаружения и дифференциации Mycobacterium bovis и Mycobacterium tuberculosis в патматериале от животных (кровь, фарингеальные смывы, бронхиальная слизь, паренхиматозные органы и лимфоузлы), а также культурах микобактерий.

Анализ по определению M.bovis и M.tuberculosis включает выделение суммарной ДНК и регистрацию специфического фрагмента ДНК с помощью ПЦР в реальном времени.

Тест-система состоит из следующих наборов

• набор для выделения ДНК (набор 1);
• набор для выявления ДНК микобактерий методом ПЦР в реальном времени (набор 2).

Тест-система рассчитанна на проведение анализа 25 образцов с двумя парами праймеров (50 ПЦР анализов) для двух видов микобактерий.

Время проведения анализа

От 3 до 6 часов.

Принцип действия

Особенность полимеразной цепной реакции в реальном времени – возможность регистрации результата ПЦР в процессе реакции, в каждый момент времени.

Для выявления продуктов амплификации в режиме реального времени используют ДНК-зонды (короткие одноцепочечные фрагменты ДНК размером 22 и 25 нуклеотидов каждый, синтезированные химическим путем), комплементарные внутренним участкам – фрагментам ДНК M. bovis и M. tuberculosis. К зондам присоединены химические соединения или две молекулы: флуоресцентная метка и гаситель флуоресценции. В ходе ПЦР происходит разрушение зонда, разъединение флуоресцентной метки и гасителя, что приводит к появлению свечения. Регистрируя интенсивность свечения, исследователь может узнать о ходе реакции без дополнительной стадии – электрофореза.

Существенным преимуществом является то, что регистрация флуоресценции происходит в закрытой пробирке, т.е. полностью исключается контаминация продуктами ПЦР.

Тест-система фактически включает два набора для выявления микобактерий различных видов: один из них является универсальным и позволяет обнаружить как Mycobacterium bovis, так и Mycobacterium tuberculosis, а другой предназначен только для выявления Mycobacterium tuberculosis.

Тест-система также позволяет дифференцировать два вида особо опасных для животных и человека микобактерий от остальных, так называемых «атипичных», микобактерий, которые не вызывают патологии и которых насчитывается в настоящее время больше 130 видов.

Хранение

Набор 2 хранят при температуре от −18 до −20°С, набор 1 – от 2 до 6°С.

Срок годности

12 месяцев.