Тест-система для обнаружения вируса диареи (ВД) крупного рогатого скота методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени

Описание

Тест-система предназначена для обнаружения вируса диареи (ВД) крупного рогатого скота методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени в образцах сывороток крови, органах больных животных, в сперме и в инфицированных культурах клеток. Тест-система позволяет определять вирус в концентрации 10-100 ИД50/мл.

Анализ по определению вируса диареи (ВД) крупного рогатого скота включает выделение суммарной РНК, проведение реакции обратной транскрипции и амплификации специфического фрагмента методом ПЦР в реальном времени.

Тест-система состоит из следующих наборов

• набор для выделения РНК (набор 1);
• набор для выявления РНК вируса диареи КРС методом ПЦР в реальном времени (набор 2).

Тест-система рассчитана на проведение 50 анализов.

Время проведения анализа

От 4 до 5 часов.

Принцип действия

Особенность полимеразной цепной реакции в реальном времени – возможность регистрации результата ПЦР в процессе реакции, в каждый момент времени.

Для выявления продуктов амплификации в режиме реального времени используют ДНК-зонд (короткий одноцепочечный фрагмент ДНК размером 20 нуклеотидов, синтезированный химическим путем), комплементарный внутреннему участку – фрагменту РНК вируса диареи КРС. К зонду присоединены два химических соединения или две молекулы: флуоресцентная метка и гаситель флуоресценции. В ходе ПЦР происходит разрушение зонда, разъединение флуоресцентной метки и гасителя, что приводит к появлению свечения. Регистрируя интенсивность свечения, исследователь может узнать о ходе реакции без дополнительной стадии – электрофореза.
Существенным преимуществом является то, что регистрация флуоресценции происходит в закрытой пробирке, т.е. полностью исключается контаминация продуктами ПЦР.

Тест-система позволяет дифференцировать вирус диареи КРС от других пестивирусов, в том числе и от вируса классической чумы свиней (КЧС).

Хранение

Набор 2 хранят при температуре от −18 до −20°С, набор 1 – от 2 до 6°С.

Срок годности

12 месяцев.