Тест-система для обнаружения вируса трансмиссивного гастроэнтерита  (ТГС) и дифференциации его от респираторного коронавируса свиней (РКВС) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР)

Описание

С помощью данной тест-системы вирус ТГС может быть обнаружен и дифференцирован от РКВС в инфицированных культурах клеток и образцах от больных животных (кровь, фекалии, сперма), а также в образцах кишечника, кусочках органов – от павших или вынужденно убитых животных.

Анализ по выявлению вируса трансмиссивного гастроэнтерита (ТГС) включает выделение суммарной РНК, совмещенную реакцию обратной транскрипции и амплификации (ОТ-ПЦР), реамплификацию и электрофорез в агарозном геле.

Тест-система состоит из следующих наборов

• набор для выделения РНК (набор 1);
• набор для выявления РНК вируса ТГС и РКВС методом ПЦР(набор 2);
• набор для проведения электрофореза (набор 3).

Тест-система рассчитана на проведение 50 анализов.

Время проведения анализа

от 8 до 16 часов (в зависимости от количества проб и используемого оборудования).

Принцип действия

Обнаружение вируса трансмиссивного гастроэнтерита (ТГС) и дифференциация от респираторного коронавируса свиней (РКВС) проводится с использованием ОТ-ПЦР. В результате реакции РНК преобразуется в кДНК и затем амплифицируется. При этом концентрация синтезированного фрагмента в исследуемой пробе увеличивается в миллионы раз, что позволяет учитывать результаты анализа с помощью электрофореза в агарозном геле.

РКВС является делеционным мутантом вируса ТГС. Тест-система устроена таким образом, что после проведения «гнездовой» ПЦР на матрице вируса ТГС образуется фрагмент размером 874 п.н., тогда как на матрице РКВС образуются короткие фрагменты размером 192-253 п.н. (в зависимости от штамма).

Места посадки праймеров являются консервативными для вирусов ТГС и РКВС, следовательно, условия амплификации также будут одинаковые. С помощью размеров ПЦР-фрагмента происходит дифференцирование двух вирусов.

Хранение

Набор 2 хранят при температуре от −18 до −20°С, наборы 1 и 3 – от 2 до 6°С.

Срок годности

12 месяцев